人腺苷脫氨酶（ADA）ELISA試劑盒說明書

人腺苷脫氨酶（ADA）ELISA試劑盒說明書由上海遠慕生物提供，本司專業經營進口/國產ELISA試劑盒，動物血清，培養基，抗體，實驗耗材，化學試劑，標準品對照品，酶聯免疫試劑盒，白介素試劑盒，金標檢測試劑盒，提供elisa試劑盒代測服務，ELISA種屬涵蓋大鼠，人，小鼠，植物，馬，魚，鴨，雞，兔，豬，犬，駱駝，牛及其他動物，咨詢！

中文名：人腺苷脫氨酶（ADA）ELISA試劑盒

別名：人腺苷脫氨酶（ADA）ELISA Kit

供應商：上海遠慕

保存條件：2-8℃

有效期：6個月

試劑盒成分：酶標板，試劑，標準品等。

產品特點：是一種敏感性高，特異性強，重復性好的實驗診斷方法，由于其試劑穩定、易保存，操作簡便，結果判斷較客觀等因素，已廣泛應用在免疫學檢。

可檢測指標：炎癥因子，血管生成素，趨化因子，生長因子等。

ELISA試劑盒試劑準備：

試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡后方可使用。

20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

人腺苷脫氨酶（ADA）ELISA檢測試劑盒組織結構：

1、 血清：操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心23分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。

2、 血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心60分鐘去除顆粒。

3、 細胞上清液：1000×g離心32分鐘去除顆粒和聚合物。

4、 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心33分鐘，取上清液。

5、 保存：如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。


人腺苷脫氨酶（ADA）ELISA試劑盒說明書 若干特點：

專一性強：抗原與抗體的免疫反應是專一反應，而免疫酶技術以免疫反應為基礎，所檢測的對象是抗原（或抗體），使用的抗體除標記了酶以外，與普通抗體的免疫反應特性并無多大差別。

靈敏度高：由于抗體聯結上了酶，因此，借助于酶與底物的顯色反應，顯示抗原與抗體的結合，大大提高了檢測的靈敏性，使檢測水平接近放射免疫測定法。

樣品易保存：經過酶反應顯示的有色產物大多比較穩定，因此有利于樣品的保存。


人腺苷脫氨酶（ADA）ELISA試劑盒操作步驟：

1、加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

2、溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

3、配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

4、洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

5、加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

6、顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘。

7、終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

注意事項：

1. 嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

2. 洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

3. 消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。

4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色，已經變藍的底物液不能使用。

5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。

6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。

7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。

9. 不能使用過期產品。

10. 如果可能傳播疾病，所有的樣品都應管理好，按照規定的程序處理樣品和檢測裝置。


ELISA試劑盒實驗洗板方法：

手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標板內的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。根據需要，重復此過程數次。

自動洗板：如果有自動洗板機，應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。


試劑盒性能：

1. 準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值，大于等于0.9900。

2. 靈敏度：zui低檢測濃度小于（參考說明書）

3. 特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

4. 重復性：板內、板間變異系數均小于15%。

5. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。