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常用緩沖液的緩沖范圍與注意事項
更新時間:2022-02-16 點擊次數:3021次
緩沖液大量稀釋后pH變化在什么范圍內
緩沖液大量稀釋后pH只是比原來的溶液有很少的變化。因為稀釋之后,會促進緩沖溶液加速水解,其ph值會因此得到補償,而不會發生劇烈的變化。
由弱酸及其鹽、弱堿及其鹽組成的混合溶液,能在一定程度上抵消、減輕外加強酸或強堿對溶液酸堿度的影響,從而保持溶液的pH值相對穩定。這種溶液稱為緩沖溶液。緩沖體系由:
1、弱酸和它的鹽(如HAc---NaAc)
2、弱堿和它的鹽(NH3·H2O---NH4Cl)
3、多元弱酸的酸式鹽及其對應的次級鹽(如NaH2PO4---Na2HPO4)的水溶液組成。
常用緩沖液的緩沖范圍
當往某些溶液中加入一定量的酸和堿時,有阻礙溶液pH變化的作用,稱為緩沖作用,這樣的溶液叫做緩沖液。
下圖展示了一些我們常用的一些緩沖液的緩沖范圍以及相應的pKa值,供選擇不同PH值的緩沖液時作為參考。
這些常用的緩沖液包括:MES、ADA、ACES、PIPES、MOPSO、BES、MOPS、TES、HEPES、TRIS、EPPS、TRICINE、BICINE、TAPS、GLYGLY、CHES、CAPS。
使用緩沖液注意這些問題
1) 緩沖液使用前必須過濾。
2) 溶劑、樣品易受到細菌和霉菌的影響,要注意清潔。
3)一般不能直接用有機溶劑做清洗沖洗。
4)梯度洗脫時,選低吸收值的緩沖液 :
例如:梯度洗脫時,緩沖液與有機相應預混,以防止析鹽。在保證峰不拖尾的情況下,盡可能選用低濃度的緩沖鹽,防止析鹽; 緩沖鹽濃度,一般用20~30mM基本上就可以了,如果流動相中有機相含量高的話,流動相中的鹽類緩沖液濃度就不能過高,鹽的濃度起碼要保證在流動相條件下不會析出。離子對緩沖液濃度要高一點,一般50~100mM。
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