關于血清學試驗方法及注意事項！

血清學試驗是抗原抗體在體外出現可見反應的總稱，故又稱抗原抗體反應。它可以用已知抗體(細菌抗血清)檢測未知抗原(待檢細菌) ，也可用已知抗原(已知病原菌)檢測患者血清中的相應細菌抗體及其效價，是臨/床診斷、實驗室研究和細菌學鑒定的重要手段之一。

一、玻片法

1、原理：用已知的診斷血清或血漿在玻片上與待檢菌及生理鹽水混合，若出現肉眼可見的特異性凝集塊，表示該菌即為相應的細菌。

2、方法：取一潔凈載玻片，用接種環取待檢菌培養物，分別與診斷血清及生理鹽水混勻，上下搖動玻片數次， 1~3 min 后觀察結果。

3、結果判斷：陽性——待檢菌明顯凝集，對照菌均勻混濁。陰性——待檢菌及對照菌均勻混濁。自凝——測定菌、對照菌均凝集(圖3 -46) 。

4、注意事項：某些細菌菌體表面常有一層表面抗原，如傷寒沙門菌的Vi 抗原及志賀菌屬的K 抗原等。它能阻抑菌體抗原與抗血清的凝集，從而導致假陰性結果。此時應將菌懸液于1000C 中煮沸1 h ，以破壞其表面抗原，然后再作試驗。

二、試管法

1、原理：此法可排除玻片法凝集試驗的非特異性凝集，是一種半定量凝集試驗。

2、方法：取小試管1 0 支，第1 管加入生理鹽水0.45 時，再加入0. 05 ml 診斷血清混勻，其余各管均加生理鹽水0 . 25 ml ，然后從第1 管中吸出0.25 ml 加入第2 管中，棍勻后再吸出0.25 ml 加入第3 管，依次類推直至第9 管，從第9 管吸出0 . 25 ml 棄去，第10 管不加抗血清為對照管。每管加待檢菌菌液(10 X 109 CFU/ ml)0 . 25ml 時，充分振蕩混勻后，置37℃水浴4 h ， 再置4℃中過夜。

3、結果判斷：以血清最高稀釋度達到(++)凝集者(管內液體澄清，部分凝集塊沉于管底)為該菌的凝集效價。若此效價達所用原診斷血清效價一半以上者為陽性。

4、注意事項：腦膜炎奈瑟菌的菌液必須經56℃ 30 min 滅活，以破壞自溶酶。若試驗出現低凝集結果時，應將該菌傳代數次后，再做實驗。