【免疫學檢測】抗原、抗體檢測原理和應用

免疫學檢測即根據抗原、抗體反應的原理,利用已知的抗原檢測未知的抗體或利用已知的抗體檢測未知的抗原。由于外源性和內源性抗原均可通過不同的抗原遞呈途徑誘導生物機體的免疫應答,在生物體內產生特異性和非特異性T細胞的克隆擴增,并分泌特異性的免疫球蛋白(抗體)。由于抗體-抗原的結合具有特異性和專一性的特點,這種檢測可以定性、定位和定量地檢測某一特異的蛋白(抗原或抗體)。

免疫學檢測技術的用途非常廣泛,它們可用于各種疾病的診斷、療效評價及發病機制的研究。最初的免疫檢測方法是將抗原或抗體的一方或雙方在某種介質中進行擴散,通過觀察抗原-抗體相遇時產生的沉淀反應,檢測抗原或抗體,最終達到診斷的目的。這種擴散可以是蛋白的自然擴散,例如環狀沉淀試驗、單向免疫擴散試驗、雙向免疫擴散試驗。

(1)單向免疫擴散試驗(single immunodiffusion test):就是在凝膠中混入抗體,制成含有抗體的凝膠板,將抗原加入凝膠板預先打好的小孔內,讓抗原從小孔向四周的凝膠自然擴散,當一定濃度的抗原和凝膠中的抗體相遇時便能形成免疫復合物,出現以小孔為中心的圓形沉淀圈,沉淀圈的直徑與加入的抗原濃度成正比。

(2)雙向免疫擴散試驗(double immunodiffusion test):一種分析鑒定抗原、抗體純度和抗原特異性的試驗。即抗原和抗體分子在凝膠板上擴散,二者相遇并達到最適比例時形成沉淀線。利用蛋白在不同酸堿度下帶不同電荷的特性,可以利用人為的電場將抗原、抗體擴散。例如:免疫電泳試驗和雙向凝膠電泳。