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人ELISA檢測試劑盒
人ELISA檢測試劑盒遠慕生物專業代理美國Amresco、Sigma、Pharmacia等品牌高質量生化試劑和試劑盒,我司代理和經銷的分子生物學試劑、生化試劑、免疫試劑、細胞培養試劑、制藥工業原料、實驗儀器與耗材、生物技術等諸多領域。
人ELISA檢測試劑盒簡單介紹:
上海遠慕生物科技有限公司隔夜試劑盒種類齊全,人ELISA試劑盒,ELISA檢測試劑盒,人ELISA檢測試劑盒,進口試劑盒等,歡迎新老客戶選購!
產品規格:48T/96T
檢測方法:ELISA酶聯免疫
待檢樣本:體液,血清,血漿,細胞培養上清液,尿液,組織勻漿,心房水標本等等。
保存條件:2-8℃
操作步驟:
方法一用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃隔夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3.加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。
4.加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
5.終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6.結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
方法二用于檢測未知抗體的間接法:
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,
每孔加0.1ml,4℃隔夜。次日洗滌3次。
↓
加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
↓
于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
操作步驟請參照說明書!
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