【微生物檢測】培養基的制備流程

培養基的質量是微生物實驗室檢測工作的基礎，事關檢測工作的準確性、可靠性，在微生物實驗室檢測工作中舉足輕重。如果在工作中忽視任何一個環節的質量問題，都將導致檢驗結果科學性、客觀性的偏離。因此，加強培養基的實驗室質量控制，認真地做好培養基的質控工作，不斷完善和提高培養基的質控水平，才能為微生物檢測實驗室提供高質量的培養基。

培養基的制備流程

1.培養基用水
培養基制備用水應使用電阻率不小于30萬Ωcm的蒸餾水或與其同質的水，最好不使用離子交換器生產的去離子水。

2.稱量
稱量時要用專用的角匙，避免交叉污染而影響檢驗結果；干粉培養基易吸潮，如有條件，盡量在濕度較低的房間稱取培養基。干粉培養基應嚴格按照生產商提供的有關說明準確配制。

3.復水
復水時不得用銅鍋或鐵鍋，以防有離子混入培養基中，影響微生物的生長；容器的大小需大于復水后培養基總體積的2倍以上，避免在加熱溶解過程中，培養基溢出；含有瓊脂粉的培養基，在加熱溶解之前可以浸泡數分鐘；加熱培養基時一定要進行攪拌，特別是瓊脂類培養基。為避免燒焦和沸騰溢出，對于少量的培養基最好使用沸水浴進行加熱。燒糊的培養基營養物質被破壞，并可產生有毒物質，如發現焦化，或未溶解均勻前培養基有溢出，該培養基即不能使用，應重新制備。對于瓊脂類培養基進行再融化時應使用沸水浴或流動蒸汽進行加熱,最多只能加熱兩次,第二次再融化后仍未用完的培養基應棄去。

4.滅菌
培養基應按培養基配方中.規定的條件及時進行滅菌，通常是121℃.15.min，以保證滅菌效果和不損傷培養基的有效成份，含糖或特殊培養基，按照國家標準或生產商提供的說明滅菌。已配制好的培養基必須立即滅菌，避免微生物生長繁殖而消耗養分，改變培養基的酸堿度。高溫可破壞培養基的營養成分，還會使瓊脂的凝膠強度下降，因此必須嚴格控制滅菌溫度和時間，并且不可重復滅菌。高壓蒸汽滅菌鍋的壓力表等要定期進行檢定，并定期采用生物指示菌法或化學變色紙片對滅菌效果進行驗證。

5.pH測定
微生物必須在適宜的pH范圍內才能正常生長繁殖或體現其生物特性。滅菌前后PH會有所變化，所以滅菌前就要準備好，可以用1mol/L.Na0H或.lmol/L.HCL調整，注意不可反復調pH，否則會影響培養基的滲透壓。

6.配制好的培養基保存
滅菌以后培養基應該迅速冷卻至所需溫度，避免長時間保存在滅菌鍋內，造成過度滅菌，影響培養基的營養成分或選擇性效果。所以建議平板傾注后立即使用。保存時,盡可能貯存在不會改變其成分的條件下，即避光或在4.℃.~.12℃冰箱密閉保存。如果保存時間超過2d,應將其放人密封的塑料袋中保存;配好的肉湯類培養基如果保存時間超過2個星期,應將其放在帶有螺旋蓋的試管或其他密閉的試管或容器中防止蒸發。

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